تأیید اثربخشی عقیم سازی اتوکلاوها

یکی از مهمترین ابزارهای آزمایشگاه میکروبیولوژی ، استریلیزر است که اتوکلاو (استریلیزر بخار فشار قوی) رایج ترین مورد استفاده قرار می گیرد. براساس GB 4789.1-2016 ، تجهیزات آزمایشگاهی باید به طور مرتب مورد بازرسی و/یا کالیبراسیون (با برچسب های بازرسی) قرار بگیرند ، برای اطمینان از عملکرد مناسب و ایمنی عملیاتی ، نگهداری و سرویس می شوند. اما آیا اتوکلاو شما تحت بازرسی قرار گرفته است؟ و اگر می خواهید تأیید را انجام دهید ، چگونه باید این کار را انجام دهید؟ امروز ، ما روشهای اصلی را برای تأیید اثربخشی عقیم سازی اتوکلاوها خلاصه خواهیم کرد.

تأیید اثربخشی استریلیزاسیون اتوکلاو به طور کلی شامل روشهایی مانند شاخص شیمیایی ، حداکثر دماسنج ، لوله دمای خود ساخته و شاخص بیولوژیکی است. اگرچه این روش ها اصول مشابهی را به اشتراک می گذارند - به طور کلی تأیید می کنند که آیا استریلیزر در طول عقیم سازی به دمای مورد نیاز می رسد - می توانید بر اساس شرایط خاص آزمایشگاه خود یک یا چند مورد را انتخاب کنید.

1. روش شاخص شیمیایی

اصل: شاخص های شیمیایی تحت شرایط خاص درجه حرارت و زمان تحت تغییر رنگ یا شکل قرار می گیرند. این تغییر برای تعیین اینکه آیا پارامترهای عقیم سازی برآورده شده است ، استفاده می شود.

یک مورد که معمولاً در آزمایشگاه ها استفاده می شود ، نوار نشانگر Autoclave 3M است که پس از عقیم سازی رنگ را تغییر می دهد. این نوار از مواد شیمیایی حساس ، توسعه دهندگان رنگ و مواد رنگ ساخته شده است که به صورت الگوی نوار روی نوار چسب چاپ می شود. آن را مستقیماً در قسمت بیرونی بسته عقیم سازی ، با حداقل طول 5 سانتی متر اعمال می شود. برای اطمینان از چسبندگی و آب بندی خوب ، نوار را به آرامی فشار دهید. پس از قرار گرفتن در معرض 121 درجه سانتیگراد به مدت 20 دقیقه یا 130 درجه سانتیگراد به مدت 4 دقیقه ، نوارهای سفید مورب روی نوار باید کاملاً سیاه شوند. اگر تغییر رنگ ناهموار یا ناقص باشد ، بسته بندی به درستی استریل در نظر گرفته نمی شود.

2. حداکثر روش دماسنج

اصل: این روش از دماسنج جیوه استفاده می کند که پس از گرم شدن به دمای پایین تر باز نمی گردد ، مشابه یک دماسنج پزشکی سنتی. این نشانگر حداکثر دمای رسیدن در هنگام عقیم سازی است.

برای تأیید ، دماسنج جیوه را درون یک فلاسک Erlenmeyer پر از آب قرار دهید. در حین عقیم سازی ، فلاسک را در قسمت های فوقانی و پایین اتوکلاو قرار دهید. پس از فرآیند ، بررسی کنید که آیا خواندن دماسنج با دمای مورد نیاز مطابقت دارد یا خیر. این روش فقط می تواند دما را تأیید کند و نمی تواند تأیید کند که آیا نیاز زمان عقیم سازی برآورده شده است ، بنابراین حداقل استاندارد برای تأیید اتوکلاو را نشان می دهد.

3. روش لوله دمای خود ساخته

اصل: این روش از مواد شیمیایی خاصی استفاده می کند که در دمای خاص ذوب و تبلور می یابد ، با فرم های کریستالی متمایز پس از خنک کننده. این مواد شیمیایی در لوله های شیشه ای کوچک مهر و موم شده و در داخل اتوکلاو قرار می گیرند. پس از عقیم سازی ، شکل کریستال بررسی می شود تا مشخص شود که آیا دمای صحیح رسیده است یا خیر.

اسید بنزوئیک معمولاً با نقطه ذوب 121-123 درجه سانتیگراد ، که با دمای استریل سازی استاندارد اتوکلاو مطابقت دارد ، استفاده می شود. اسید بنزوئیک جامد در لوله های شیشه ای کوچک مهر و موم شده و در اتوکلاو قرار می گیرد. پس از عقیم سازی ، وضعیت اسید بنزوئیک مشاهده می شود که آیا دمای هدف حاصل شده است یا خیر. مانند حداکثر روش دماسنج ، این روش فقط دما را تأیید می کند ، نه مدت زمان عقیم سازی.

4. روش نشانگر بیولوژیکی

اصل: این روش از اسپورهای غیر بیماری زا از geobacillus stearothermophilus به عنوان ارگانیسم های شاخص برای ارزیابی اثربخشی عقیم سازی حرارتی استفاده می کند. این اسپورها بسیار مقاوم در برابر گرما هستند ، با مقاومت شبیه به اسپورهای بوتولینوم کلستریدیوم بیماری زا ، آنها را شاخص های مناسبی برای تأیید اثربخشی عقیم سازی می کند.

شاخص های بیولوژیکی به سه شکل موجود است: تعلیق اسپور ، نوارهای اسپور و لوله های یکپارچه اسپور و متوسط. اینها به طور معمول در پنج مکان در ظرف عقیم سازی قرار می گیرند: جلو ، میانه و پشت لایه پایین و همچنین نقاط مرکزی لایه های فوقانی و میانه. پس از عقیم سازی ، شاخص ها در آب بروموکرسول بنفش گلوکز پپتون تلقیح شده و در دمای 55-60 درجه سانتیگراد به مدت 2-7 روز انکوبه می شوند. اگر محیط روشن و بدون تغییر رنگ باقی بماند ، اسپورها کشته می شوند و این نشانگر عقیم سازی خوب است. اگر محیط زرد و زبر شود ، اسپورها زنده مانده اند ، و عملکرد عقیم سازی ضعیف را نشان می دهد. هر دو سیستم تعلیق اسپور و نوارهای اسپور از همان فرآیند اعتبارسنجی پیروی می کنند.

لوله های نشانگر بیولوژیکی تجاری نیز معمولاً در آزمایشگاه ها مورد استفاده قرار می گیرند. آنها حاوی اسپورهای Geobacillus stearothermophilus و یک آمپول شیشه ای مهر و موم شده با محیط رشد هستند. لوله ها در سراسر ظرف عقیم سازی قرار می گیرند. پس از اتوکلاو ، آمپول شیشه ای خرد می شود تا محیط را آزاد کند و لوله در دمای 56 درجه سانتیگراد ، در کنار یک کنترل مثبت انکوبه می شود. اگر عقیم سازی ناکافی باشد ، اسپورهای زنده مانده رشد می کنند و آبگوشت را زرد می کنند. اگر عقیم سازی مؤثر باشد ، اسپورها غیرفعال می شوند و آبگوشت بنفش باقی می ماند.

فرکانس تأیید

در حال حاضر ، هیچ استاندارد ملی دقیق در مورد فراوانی تأیید اثربخشی اتوکلاو وجود ندارد. انتظار می رود آزمایشگاه ها برنامه های تأیید خود را تعیین کرده و کاملاً به آنها پایبند باشند. با توجه به سهولت استفاده و قابلیت اطمینان نتایج ، توصیه می کنیم از نوار شاخص در ترکیب با لوله های نشانگر بیولوژیکی استفاده کنید ، زیرا آنها عملکرد ساده و تأیید جامع اثربخشی عقیم سازی را ارائه می دهند.

یادداشت ها در مورد عقیم سازی (برای برخی از اتوکلاوهای کاملاً خودکار وارد شده لازم نیست)
هنگام استفاده از استریلیزر بخار با فشار بالا ، بیرون کشیدن تمام هوای سرد در داخل محفظه هنگام آزاد شدن بخار بسیار مهم است. فقط پس از بسته شدن همه هوای سرد در صورت بسته شدن شیر اگزوز. اگر هر هوا باقی بماند ، فشار فشار ممکن است فشار صحیح را نشان دهد ، اما دمای واقعی داخل محفظه کم می شود. هرچه هوای بیشتری حفظ شود ، اختلاف بین فشار و دما بیشتر می شود ، که به طور بالقوه منجر به عقیم سازی ناقص می شود. (این اغلب در هنگام عقیم سازی محیط تخمیر ، جایی که حباب های هوا در لوله های راهنمای کوچک باقی می مانند - سعی می کند هوای سرد را به طور کامل خسته کند.) $ $