تأیید اثر عقیم سازی اتوکلاو

یکی از ابزارهای ضروری آزمایشگاهی در آزمایشگاه میکروبیولوژی ، استریلیزر است که اتوکلاوها متداول ترین نوع هستند. براساس GB 4789.1-2016 ، تجهیزات آزمایشگاهی باید به طور مرتب مورد بازرسی و/یا کالیبراسیون (با برچسب زدن مناسب) قرار بگیرند ، برای اطمینان از عملکرد و ایمنی عملیاتی ، نگهداری و سرویس می شوند. اما آیا استریلیزر شما تحت بازرسی های مشابه قرار می گیرد؟ اگر چنین اعتبار سنجی لازم است ، چگونه باید انجام شود؟

امروز ، ما جنبه های کلیدی اعتبار سنجی استریلیزاسیون را برای اتوکلاوها خلاصه خواهیم کرد.

روشهای متداول برای اعتبار سنجی استریلیزاسیون اتوکلاو شامل روش نشانگر شیمیایی ، روش دماسنج نقطه ثابت ، روش پروب دمای خود ساخته و روش شاخص بیولوژیکی است. اصول موجود در این روشها مشابه است ، در درجه اول بر تأیید اینکه آیا دمای داخل استریلیزر در طول عقیم سازی به سطح مورد نیاز می رسد. بسته به شرایط خاص آزمایشگاه ، می توان یک یا چند روش را برای اعتبار سنجی انتخاب کرد.

1. روش شاخص شیمیایی
اصل: شاخص های شیمیایی هنگام قرار گرفتن در معرض دما و مدت خاص ، تحت تغییر رنگ یا تغییر شکل قرار می گیرند و امکان ارزیابی اینکه آیا پارامترهای عقیم سازی برآورده شده است ، امکان پذیر است.

یک شاخص متداول در آزمایشگاه ها نوار نشانگر 3M اتوکلاو است که قبل و بعد از عقیم سازی رنگ را تغییر می دهد تا اثربخشی را نشان دهد. این نوار با مواد شیمیایی حساس به گرما و عوامل توسعه رنگ چاپ شده در نوارها روی نوار چسب مخصوص ساخته شده است. نوار باید در قسمت بیرونی بسته ، با حداقل طول 5 سانتی متر استفاده شود و برای چسبندگی بهتر و آب بندی محکم فشار داده شود. پس از عقیم سازی در دمای 121 درجه سانتیگراد به مدت 20 دقیقه یا 130 درجه سانتیگراد به مدت 4 دقیقه ، نوارهای سفید مورب روی نوار کاملاً سیاه می شوند. اگر تغییر رنگ ناهموار یا ناقص باشد ، بسته ممکن است شرایط عقیم سازی را برآورده نکند.

2. روش دماسنج نقطه ثابت
اصل: این روش از دماسنج جیوه استفاده می کند که بالاترین دمای رسیدن ، مشابه یک دماسنج بالینی سنتی را حفظ می کند. این امر به تعیین حداکثر دمای حاصل از اتوکلاو در طول عقیم سازی کمک می کند.

برای اعتبار سنجی ، یک دماسنج جیوه در داخل یک فلاسک مخروطی بزرگ پر از آب قرار می گیرد. در حین عقیم سازی ، فلاسک در هر دو بخش فوقانی و پایین اتوکلاو قرار می گیرد. پس از عقیم سازی ، خواندن دماسنج در برابر دمای مورد نیاز بررسی می شود. با این حال ، این روش فقط دما را تأیید می کند و تأیید نمی کند که آیا مدت زمان عقیم سازی کافی بوده است ، و آن را به عنوان اساسی ترین استاندارد برای اعتبارسنجی اتوکلاو تبدیل می کند.

3. روش پروب دمای خود ساخته
اصل: این روش از ویژگی های ذوب و تبلور مجدد مواد شیمیایی خاص در هنگام قرار گرفتن در معرض گرما استفاده می کند. با آب بندی این مواد شیمیایی در داخل لوله های شیشه ای کوچک و قرار دادن آنها در اتوکلاو ، تشکیل کریستال پس از عقیم سازی می تواند نشان دهد که آیا به دمای مورد نیاز رسیده است یا خیر.

یک معرف که معمولاً مورد استفاده قرار می گیرد ، بنزوئیک اسید است که دارای نقطه ذوب 121-123 درجه سانتیگراد است که از نزدیک دمای عقیم سازی مورد نیاز را مطابقت می دهد. در حین عقیم سازی ، اسید بنزوئیک جامد در یک لوله شیشه ای کوچک بسته می شود و درون اتوکلاو قرار می گیرد. پس از فرآیند ، ساختار کریستالی اسید بنزوئیک برای تعیین اینکه آیا دمای مورد نیاز حاصل شده است ، بررسی می شود.

مانند روش دماسنج نقطه ثابت ، این روش فقط دما را نشان می دهد و نمی تواند تأیید کند که آیا مدت زمان عقیم سازی کافی است یا خیر.

4. روش نشانگر بیولوژیکی
اصل: این روش از اسپورهای غیر پاتوژنیک استروترموفیلوس به عنوان ارگانیسم های شاخص برای ارزیابی اثربخشی عقیم سازی گرما استفاده می کند. این اسپورها در برابر گرما بسیار مقاوم هستند و از مقاومت حرارتی مشابه اسپورهای کلستریدیوم بوتولینوم برخوردار هستند و آنها را به یک مرجع قابل اعتماد برای ارزیابی اینکه آیا اتوکلاو نیازهای عقیم سازی را برآورده می کند ، می کند.

شاخص های بیولوژیکی به سه شکل آمده است:

تعلیق اسپور
نوارهای اسپور
نوارهای اسپور همراه با یک محیط کشت (لوله های نشانگر بیولوژیکی)
شاخص های بیولوژیکی به طور معمول در پنج مکان در داخل محفظه عقیم سازی قرار می گیرند:

سطح پایین: جلو ، میانه و عقب
سطح بالایی: مرکز
پس از عقیم سازی ، شاخص ها به آب پپتون بنفش پلپلز بروموکرسول تلقیح می شوند و به مدت 2-7 روز در دمای 55-60 درجه سانتیگراد انکوبه می شوند:

اگر محیط کشت از نظر رنگ روشن و بدون تغییر باقی بماند ، اسپورها کشته شده اند ، که نشانگر عقیم سازی مؤثر است.
اگر متوسط ​​به رنگ زرد و زبر به صورت زرد روشن شود ، اسپورها زنده مانده اند ، به این معنی که روند عقیم سازی بی اثر بود.
همان روش اعتبار سنجی در مورد سیستم تعلیق اسپور و نوارهای اسپور اعمال می شود.

بسیاری از آزمایشگاه ها همچنین از لوله های نشانگر بیولوژیکی تجاری استفاده می کنند که به طور مشابه با تعلیق اسپور و نوارها کار می کنند. این لوله ها حاوی اسپورهای G. stearothermophilus به همراه یک آمپول شیشه ای از محیط کشت هستند. پس از اتوکلاو ، آمپول شیشه ای در داخل لوله خرد می شود تا محیط کشت را آزاد کند ، و لوله در دمای 56 درجه سانتیگراد انکوبه می شود ، با کنترل مثبت.

اگر عقیم سازی بی اثر باشد ، اسپورهای زنده رشد می کنند و آبگوشت را زرد می کنند.
اگر عقیم سازی موفقیت آمیز بود ، اسپورها غیرفعال می شوند و آبگوشت بنفش باقی می ماند.
فراوانی اعتبار سنجی اتوکلاو
در حال حاضر ، هیچ استاندارد نظارتی دقیق وجود ندارد که مشخص شود که باید به طور مکرر اتوکلاو را تأیید کرد. با این حال ، آزمایشگاه ها باید برنامه اعتبار سنجی خود را تعیین کرده و کاملاً به آن پایبند باشند.

برای سهولت در عملکرد و اعتبار سنجی قابل اعتماد ، نوار نشانگر شیمیایی و لوله های نشانگر بیولوژیکی بسیار توصیه می شوند. این روشها کاربرپسند هستند و ارزیابی جامع از اثربخشی عقیم سازی را ارائه می دهند.

ملاحظات اصلی برای اتوکلاو
(برخی از اتوکلاوهای وارداتی کاملاً خودکار ممکن است نیاز به تهویه دستی نداشته باشند)

هنگام استفاده از اتوکلاو ، هنگام معرفی بخار ، هوای سرد را از محفظه خارج کنید. دریچه اگزوز باید تا زمانی که تمام هوای سرد اخراج نشود ، باز باشد و از توزیع درجه حرارت یکنواخت در داخل آن اطمینان حاصل شود.

اگر هر هوا در داخل محفظه باقی بماند ، فشار فشار ممکن است فشار صحیح را نشان دهد ، اما دمای واقعی پایین تر از حد انتظار خواهد بود. هرچه هوای باقیمانده تر باشد ، اختلاف بیشتر می شود و منجر به عقیم سازی ناقص می شود.

(برای کسانی که هنگام استریل کردن رسانه های مبتنی بر تخمیر ، در لوله های کوچک با حباب های هوا روبرو می شوند ، برای بهبود نتایج ، تخلیه هوا را افزایش دهید.) $ $